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ELISA實驗，即酶聯免疫吸附測定（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）實驗，是免疫學中的經典實驗之一，它是一種利用抗原抗體特異性結合進行免疫反應的定性和定量檢測方法，目前已被廣泛應用于生物學、醫學、植物學、病理學等多種研究領域。
ELISA實驗是將已知的抗原或抗體結合在固相載體表面，然后利用酶標記（偶聯）的抗體或抗原與之孵育，再通過顯色物顯色，其顯色深淺與待測物質的含量直接相關，由此可進行定性或定量分析。
原理：將抗原或抗體固定于酶標板上，然后用酶標抗體或抗原直接檢測。
主要用途：分析抗原的免疫反應。
優點 | 缺點 |
l 步驟少，實驗周期短，檢測速度快 l 不需二抗，交叉反應較低，實驗不易出錯 | l 實驗背景高，且檢測對象有限 l 靈活性差，需要針對每種靶蛋白的特異性一抗 l 檢測靈敏度不高，沒有使用二抗，信號沒有放大 |
原理：將抗原或抗體固定于酶標板上，隨后分兩步進行檢測，先加入檢測抗體或抗原進行特異性結合，后加入酶標二抗檢測并利用底物顯色。
主要用途：測定樣品中總抗體的濃度。
優點 | 缺點 |
l 使用酶標二抗，靈敏度高 l 標記抗體更少，更加經濟，也更靈活 | l 可能存在交叉反應，增加實驗背景 l 增加了二抗孵育步驟，實驗周期延長 |
雙抗體夾心法：將此方法常用于檢測抗原。將抗體固定在固相載體上，加入待測抗原，與抗體特異性結合，再加入酶標抗體檢測，并利用底物顯色，即可測定總靶標蛋白的含量。
雙抗原夾心法：反應模式與雙抗體夾心法類似，用固相抗原和酶標特異性抗原，分別代替固相抗體和酶標特異性抗體，即可測定樣品中的抗體。
主要用途：對復雜樣品進行分析，適用于檢測具有兩個以上識別位點的大分子蛋白。
優點 | 缺點 |
l 靈敏度和特異性高 l 抗原無需事先純化 | l 對配對抗體要求高 |
原理：樣本中的抗原及預包被的酶標抗原，競爭性地與固相抗體相結合。樣本中的抗原含量越多，結合在固相上的酶標抗原就越少，最終顯色也越淺。顯色結果與待檢抗原（或抗體）的量成反比。
主要用途：常用于只有一種抗體可用于目標抗原的情況，也適用于檢測不能被兩種不同抗體結合的小抗原。
優點 | 缺點 |
l 可檢測不純的樣品，數據再現性高 l 可基于其他ELISA方法，靈活性高 | l 整體敏感性和專一性較差 l 操作繁瑣復雜 |
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