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印跡雜交,是基因診斷技術的一種,根據作用對象的區別可分為Northern雜交、Southern雜交和Western雜交。Northern雜交用于分析RNA;Southern雜交用于分析DNA;Western雜交用于分析蛋白質。其操作過程所需的試劑量少,靈敏度高,所以應用較為普遍。
DNA變性的本質是雙鏈間氫鍵的斷裂
原理:
生命大分子物質(如核酸或蛋白質)印跡到固相載體上,經淬滅試劑處理后,可與相應的探針(酶標記)反應,接著用適當的溶液漂洗,底物溶液顯色,即可現出譜帶。如所用探針為放射性核素標記物時,則應將漂洗后的載體進行放射自顯影,即可檢測出樣品中特異的成分。
簡而言之,主要就是通過核酸分子在變性后再復性的過程中,可引入其他來源的核酸進行互補配對的特性,通過探針進行標記,可對DNA/RNA/蛋白質進行定性和定量分析。
目前印跡技術是目前生物醫學研究中常用的基本分子生物學技術,在生物醫學基礎研究以及臨床診斷應用等方面廣泛應用,譬如用于基因克隆的篩選、基因的定量和定性分析及基因突變的檢測等。
印跡雜交技術中,樣品混勻是的一個實驗環節,無論是樣本制備過程中待測樣本的純化和提取,還是之后的凝膠洗脫,都需要運行穩定的樣品混勻裝置。
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