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由以上可知，微生物的定量分析并不是像我們想的那樣，把試管一放，儀器一按，就可以得到答案的。下面就為您解答，當(dāng)拿到一份未知濃度的細(xì)菌培養(yǎng)液時(shí)，怎樣用OD值來進(jìn)行定量分析。

（1）怎樣選的波長？
答：一般都采用550-650，其實(shí)如果波長一定的話，即之后做標(biāo)準(zhǔn)曲線也是當(dāng)時(shí)測量的波長的話，基本沒什么影響。

（2）如果菌液超出該菌種濃度的適用范圍呢？
答：可以稀釋。同行們有個(gè)0.2-0.7的說法，但具體如何，感覺也和微生物種類有很大關(guān)系。反正如果太濃的話，一定要稀釋就對(duì)了。

（3）測完OD值，你就知道該菌液的微生物數(shù)量了？
答：還沒有。還存在2個(gè)問題：
①測量OD值的結(jié)果反映一般只是總菌數(shù)。在對(duì)數(shù)生長期時(shí)，OD值和活菌數(shù)呈現(xiàn)一定的線性關(guān)系，但穩(wěn)定期時(shí)，細(xì)菌的一部分在生長，一部分已經(jīng)死亡，此時(shí)反映的只能是總菌數(shù)的增多，但活菌數(shù)卻無法反映。
②當(dāng)菌體較為規(guī)則，菌群分布較為均勻，干擾OD測量的因素較少，但對(duì)于菌體過大或絲狀菌體懸液，如絲狀真菌，則會(huì)因?yàn)榉植季鶆蚨燃罢凵浞瓷溆绊懝馕盏葐栴}導(dǎo)致測量結(jié)果不準(zhǔn)確。

解決方案：一般行業(yè)中，有估算1 OD=10^8 cells/ml。但是還需要結(jié)合具體的菌種，這里推薦方法是可以提前測量一下該菌種的標(biāo)準(zhǔn)曲線或得到一個(gè)相關(guān)的方程式。橫坐標(biāo)是OD值，縱坐標(biāo)是該微生物較的計(jì)數(shù)指標(biāo)，采用顯微鏡計(jì)數(shù)、涂板菌落計(jì)數(shù)等，或者流式細(xì)胞儀都可以，然后你進(jìn)行換算即可得到菌液的微生物數(shù)量了。